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          人 (Human) IIIELISA 檢測試劑盒的操作使用

          發(fā)布時間: 2013/10/28  點擊次數(shù): 550次
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          ELISA檢測試劑盒操作注意事項
          試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
          實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
          不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
          使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
          使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
          洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
          底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
          加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
          按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

          ELISA檢測試劑盒樣品收集、處理及保存方法
          血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
          血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
          細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
          組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
          保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

          試劑的準備
          標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行:
          800 ng/ml (6號標準品) 原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。
          400 ng/ml (5號標準品) 100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液
          200 ng/ml (4號標準品) 100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液
          100 ng/ml (3號標準品) 100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液
          50 ng/ml (2號標準品) 100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液
          25 ng/ml (1號標準品) 100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液
          0 ng/ml (空白對照) 原始濃度不用稀釋直接加入50ul。

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