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          趨化因子配體5 (RANTES/CCL5)ELISA 檢測(cè)試劑盒

          發(fā)布時(shí)間: 2013/11/22  點(diǎn)擊次數(shù): 566次
          提 供 商: 研域(上海)化學(xué)試劑有限公司 資料大小:
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          ELISA 檢測(cè)試劑盒試驗(yàn)原理:

          RANTES/CCL5試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知RANTES/CCL5濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將RANTES/CCL5和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中RANTES/CCL5的濃度呈比例關(guān)系。

           

          ELISA 檢測(cè)試劑盒內(nèi)容及其配制

          試劑盒成份(2-8℃保存)

          96孔配置

          48孔配置

          配制

          96/48人份酶標(biāo)板

          1塊板(96T)

          半塊板(48T)

          即用型

          塑料膜板蓋

          1塊

          半塊

          即用型

          標(biāo)準(zhǔn)品:4.0ng/ml

          1瓶(0.6ml)

          1瓶(0.3ml)

          按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行稀稀

          空白對(duì)照

          1瓶(1.0ml)

          1瓶(0.5ml)

          即用型

          標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液

          1瓶(4.0ml)

          1瓶(2.0ml)

          即用型

          生物素標(biāo)記的抗RANTES/CCL5抗體

          1瓶(6.0ml)

          1瓶(3.0ml)

          即用型

          親和鏈酶素-HRP

          1瓶(8.0ml)

          1瓶(4.0ml)

          即用型

          洗滌緩沖液

          1瓶(20ml)

          1瓶(10ml)

          按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行稀釋

          底物A

          1瓶(6.0ml)

          1瓶(3.0ml)

          即用型

          底物B

          1瓶(6.0ml)

          1瓶(3.0ml)

          即用型

          終止液

          1瓶(6.0ml)

          1瓶(3.0ml)

          即用型

          標(biāo)本稀釋液

          1瓶(12ml)

          1瓶(6.0ml)

          即用型

           

          自備材料

          • 蒸餾水。
          • 加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
          • 振蕩器及磁力攪拌器等。

           

          安全性

          • 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。
          • 實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
          • 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

           

          操作注意事項(xiàng)

          • 試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
          • 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
          • 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
          • 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
          • 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
          • 洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
          • 底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
          • 加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
          • 按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

           

          ELISA 檢測(cè)試劑盒樣品收集、處理及保存方法

          • 血清-----操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
          • 血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
          • 細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
          • 組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
          • 保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

           

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