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          小鼠ELISA試劑盒飯膠原酶I(Collagenase I)的說明書

          發(fā)布時間: 2014/1/22  點擊次數(shù): 562次
          提 供 商: 研域(上海)化學(xué)試劑有限公司 資料大小:
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          小鼠ELISA試劑盒使用目的:本試劑盒用于測定血清、血漿及相關(guān)液體樣本中待測物質(zhì)的含量。
          實驗原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測定標(biāo)本中待測物質(zhì)水平。用純化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被單抗的微孔中依次加入待測物質(zhì),再與HRP標(biāo)記的抗原抗體結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的。顏色的深淺和樣品中的待測物質(zhì)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物質(zhì)的濃度。
          試劑盒組成

          標(biāo)本要求
          1.標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
          2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
          小鼠ELISA試劑盒操作步驟
          1)標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

          2)加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
          3)溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
          4)配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
          5)洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
          6)加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
           

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