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          現(xiàn)貨人p53 蛋白ELISA檢測試劑盒的試驗(yàn)方法

          發(fā)布時(shí)間: 2012/11/28  點(diǎn)擊次數(shù): 511次
          提 供 商: 研域(上海)化學(xué)試劑有限公司 資料大小:
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          上海研域網(wǎng)絡(luò)有限公司專業(yè)供應(yīng)各種屬ELISA試劑盒,金標(biāo)試劑盒,細(xì)胞株,抗體,生物試劑,生物耗材,食品檢測試劑盒,放免試劑盒,胎牛血清,提供免費(fèi)代測服務(wù),保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果客觀真實(shí)性。

          人p53 蛋白ELISA檢測試劑盒

          試驗(yàn)原理:
              p53 protein試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知p53 protein濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將p53 protein和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中p53 protein的濃度呈比例關(guān)系。

          自備材料
          蒸餾水。
          加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
          振蕩器及磁力攪拌器等。

          安全性
          避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。
          實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
          不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

          人p53 蛋白ELISA檢測試劑盒

          操作注意事項(xiàng)
          試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
          實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
          不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
          使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
          使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
          洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
          底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
          加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
          按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

          人p53 蛋白ELISA檢測試劑盒

          操作步驟
          使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
          根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
          加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。
          甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
          每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
          甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
          每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
          取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
          在450nm波長處測定各孔的OD值。

          局限
          6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到的結(jié)果。

          試劑盒性能
          1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
          2. 特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。
          3. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

          人p53 蛋白ELISA檢測試劑盒

          結(jié) 果 判 斷 與 分 析
          1、儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值
          2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的p53 protein標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的p53 protein含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。
          3、檢測值范圍:0-80IU/ml
          4、敏感度: 0.1 IU/ml
          Chymostatin 胰凝乳蛋白酶抑制劑 [9076-44-2] 5mg
          Chymotrypsinalpha- TLCK Treated TLCK-treated 胰凝乳蛋白酶 [9004-07-3] 25mg
          Chymotrypsinalpha- TLCK Treated TLCK-treated 胰凝乳蛋白酶 [9004-07-3] 100mg
          Chymotrypsinalpha 胰凝乳蛋白酶 [9004-07-3] 100mg
          Chymotrypsin 胰凝乳蛋白酶 [9004-07-3] 1g
          Chymotrypsin 胰凝乳蛋白酶 [9004-07-3] 5g
          Chymotrypsinogen A 胰凝乳蛋白酶原 A [9035-75-0] 1g
          Chymotrypsinogen A 胰凝乳蛋白酶原 A [9035-75-0] 5g
          Chymotrypsinogen 胰凝乳蛋白酶原 / 1g
          Chymotrypsinogen 胰凝乳蛋白酶原 / 5g
          Cinchonine 辛可寧 [118-10-5] 10g
          Cinnamic acid 肉桂酸 [140-10-3] 50g
           

          若需要了解試劑盒的詳細(xì)信息,詳情請(qǐng):謝明: 

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