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          容易讓ELISA試劑盒變質(zhì)的因素

          發(fā)布時(shí)間: 2018-01-04  點(diǎn)擊次數(shù): 1104次

          ELISA試劑盒為什么會(huì)蛻變呢?是什么影響了ELISA試劑盒質(zhì)保?一旦蛻變會(huì)有什么影響呢?
          1.辦法學(xué)的影響   
          ELISA測定形式包含以下幾種:雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競賽抑制法,其中競賽抑制法(HBeAb,HBcAb等采用)因受操作時(shí)差所引起的不公平競賽等要素的影響,成果重復(fù)性較差,質(zhì)量較難操控。
          2.試劑要素
          不同批次的ELISA試劑在制造進(jìn)程中很難確保質(zhì)量*一致,即使是經(jīng)過批批檢的項(xiàng)目其檢測成果也存在差異,因而有必要挑選和訂貨長批號(hào)的試劑,并確保保存條件。嚴(yán)格執(zhí)行這一規(guī)范可以防止因試劑批號(hào)改動(dòng)而從頭樹立質(zhì)控系統(tǒng)及從頭評(píng)價(jià)試劑的雜亂進(jìn)程,而且可以確保成果的穩(wěn)定性;關(guān)于效期短、使用率低的試劑,應(yīng)當(dāng)小量分裝,每次使用則取分裝部分即可,防止重復(fù)凍融形成試劑的失效。
          3.ELISA試劑盒樣本要素
          標(biāo)本干擾要素包含內(nèi)源性干擾要素和外源性干擾要素,前者包含類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、異嗜性抗體、自身抗體、溶菌酶等,后者包含標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染、標(biāo)本儲(chǔ)存時(shí)刻過長、標(biāo)本凝結(jié)不全、冷凍標(biāo)本的重復(fù)凍融等。
          4.操作要素
          ELISA操作進(jìn)程雜亂,操作不妥將引起較大的差錯(cuò)。加樣、溫育、洗刷、顯色、比色。
          5.灰區(qū)的設(shè)置
          通常情況下,ELISA定性試驗(yàn)以“陽性”和“陰性”來報(bào)告成果,兩者間有一條分界線被稱為“陽性判別值”(cut-off value,CO值),這是定性免疫測定成果報(bào)告的根據(jù)。
          6.標(biāo)本復(fù)查
          ELISA手藝檢測進(jìn)程雜亂,影響要素較多,即使室內(nèi)質(zhì)控在控,也可能因孔間差異而形成成果的差異,因而加大復(fù)查力度是確保成果準(zhǔn)確性的牢靠辦法,比如對(duì)HBsAg、HBeAg、HCV-Ab、HIV-Ab、TP-Ab等項(xiàng)目的可疑、弱陽性標(biāo)本及罕見形式的檢測成果進(jìn)行復(fù)查。
          7.ELISA試劑盒常表明成果的常用辦法
          a.定性測定
          b.半定量測定 成果一般以滴度表明。
          c.定量測定 即用已知量的規(guī)范品作一系列稀釋后進(jìn)行ELISA測定,制作規(guī)范曲線,成果以量或單位表明。在ELISA定量檢測中每一塊反響板都有必要制作相應(yīng)的規(guī)范曲線。

           

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