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          中科院動(dòng)物研究所分離出小鼠皮膚干細(xì)胞

          發(fā)布時(shí)間: 2009-08-07  點(diǎn)擊次數(shù): 2879次

          來(lái)自中科院動(dòng)物研究所的段恩奎等人從小鼠分離和鑒定了SKPs(皮膚干細(xì)胞),這一研究成果公布在Cell Proliferation 雜志上。

               SKPs表達(dá)Nestin、Fibronectin、Stat3和Oct4等干細(xì)胞標(biāo)記分子。SKPs能在體外擴(kuò)增并穩(wěn)定維持其干細(xì)胞特性,并能自發(fā)向神經(jīng)細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞和脂肪細(xì)胞分化。本研究在體外利用三步法誘導(dǎo)小鼠干細(xì)胞分化為三維胰島樣集落(IPCs)。在Stage 1中,SKPs以懸浮的細(xì)胞球傳代培養(yǎng)在DMEM/F12培養(yǎng)基(含有20 ng/ml表皮生長(zhǎng)因子、40 ng/ml 堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、1% B27,培養(yǎng)基葡萄糖的濃度為17.3mM)。在Stage 2中,SKPs在DMEM/F12培養(yǎng)基(含有1 mM二丁酰環(huán)腺苷酸、1 μM維甲酸、1% B27 和2% FBS,培養(yǎng)基葡萄糖濃度為5mM)中培養(yǎng)2天,SKPs從細(xì)胞球中遷移出來(lái)形成單層細(xì)胞。在Stage 3中,細(xì)胞在DMEM/F12培養(yǎng)基(含有10 mM 煙酰胺、10 nM I型胰島素樣生長(zhǎng)因子、2nM 激活素A、1% B27和2% FBS,培養(yǎng)基葡萄糖濃度為17.3mM)的中培養(yǎng)7天,細(xì)胞能夠形成二硫腙陽(yáng)性(Dithizone positive, DTZ+)的三維胰島樣集落(IPCs)。RT-PCR和間接免疫熒光的結(jié)果表明,IPCs共表達(dá)胰島素和C-肽,并表達(dá)胰腺β細(xì)胞發(fā)育和功能相關(guān)的基因和轉(zhuǎn)錄因子,如Insulin 1、Insulin 2、Islet-1、Pdx-1、NeuroD/beta2、Glut-2 和 Nkx6.1,但不表達(dá)胰腺中其它的激素,如胰高血糖素、生長(zhǎng)激素抑制素和淀粉酶。體外葡萄糖刺激的功能性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,IPCs受葡萄糖濃度刺激而分泌胰島素。

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