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          科研試劑盒實(shí)驗(yàn)中緩沖溶液等試劑的配置

          發(fā)布時(shí)間: 2013-08-21  點(diǎn)擊次數(shù): 1104次

          ELISA實(shí)驗(yàn)中是以抗原和抗體的免疫反應(yīng)為基礎(chǔ),ELISA試劑盒以及各種溶液如何配置?zui近剛做了下ELISA實(shí)驗(yàn),把各種ELISA配置方法匯總?cè)缦拢?br />(1) ELISA實(shí)驗(yàn)包被緩沖液
          (2) ELISA實(shí)驗(yàn)洗滌緩沖液(2) ELISA實(shí)驗(yàn)洗滌緩沖液
          (3) ELISA實(shí)驗(yàn)稀釋液;
          (4)ELISA實(shí)驗(yàn)終止液
          (5)ELISA底物緩沖液
          (6)ELISA實(shí)驗(yàn)TMB
          (四甲基聯(lián)苯胺)使用液
          (7) ELISA實(shí)驗(yàn)ABTS使用液
          (8)ELISC。

          試劑

          (1) ELISA實(shí)驗(yàn)包被緩沖液(PH9.6 0.05M碳酸鹽緩沖液):

          NaHCO3 1.59克

          NaHCO3  2.93克

          加蒸餾水至1000ml

          (2) ELISA實(shí)驗(yàn)洗滌緩沖液(PH7.4 PBS):0.15M

          KH2PO4       0.2克

          Na2HPO4·12H2O  2.9克

          NaCl        8.0克

          KCl         0.2克

          Tween-20 0.05%  0.5ml

          加蒸餾水至1000ml

          (3) ELISA實(shí)驗(yàn)稀釋液:

          牛血清白蛋白(BSA) 0.1克

          加洗滌緩沖液至100ml

          或以羊血清、兔血清等血清與洗滌液配成5~10%使用。

          (4)  ELISA試劑盒 實(shí)驗(yàn)終止液(2M H2SO4):

          蒸餾水178.3ml,逐滴加入濃硫酸(98%)21.7ml。

          (5) ELISA底物緩沖液(PH5.0磷酸棗檸檬酸):

          0.2M Na2HPO4(28.4克/L) 25.7ml

          0.1M 檸檬酸(19.2克/L)      24.3ml

          加蒸餾水50ml。

          (6) ELISA實(shí)驗(yàn)TMB(四甲基聯(lián)苯胺)使用液:

          TMB(10mg/5ml無水乙醇) 0.5ml

          底物緩沖液(PH5.5)    10ml

          0.75%H2O2 32μl

          (7) ELISA實(shí)驗(yàn)ABTS使用液:

          ABTS        0.5mg

          底物緩沖液(PH5.5)  1ml

          3%H2O2 2μl

          (8)ELISA實(shí)驗(yàn)封閉液:

          牛血清白蛋白(BSA) 5克

          加洗滌緩沖液至100ml。

          值得一提的是有的封閉液中含有脫脂奶粉,不適合長期保存。

          生物幫推薦 ELISA試劑盒 相關(guān)產(chǎn)品,詳情見:封閉試劑、終止溶液、封閉肽、ELISA稀釋液、ELISA試劑盒、ELISA緩沖液、ELISA洗脫緩沖液

          為了保證ELISA實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性,實(shí)驗(yàn)操作中加入的緩沖液和各組分一定要,將洗滌液加入酶標(biāo)板中的時(shí)候防止加入的試劑混入另外一個(gè)酶標(biāo)孔,嚴(yán)防交叉污染。

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