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          人高遷移率族蛋白B1(HMG-B1)ELISA試劑盒組成

          發(fā)布時間: 2014-07-03  點擊次數(shù): 836次

          人(human)高遷移率族蛋白B1(HMG-B1)ELISA試劑盒  
          本試劑盒僅供研究使用      標本:血清或者血漿

          一、試 劑 組 成
          精密度微孔板96孔    (Microtitration Strips)    1塊    2~8℃干燥保存
          酶標偶合液    (Conjugate )       1瓶 12.0毫升    2~8℃冷藏保存
          標準品    (Standard)    5瓶 各1.0毫升    2~8℃冷藏保存
          呈色劑A    (Substrate A)     1瓶 6.0毫升    2~8℃避光冷藏保存
          呈色劑B    (Substrate B)     1瓶 6.0毫升    2~8℃避光冷藏保存
          終止液    (Stopping Solution)    1瓶 6.0毫升    室溫保存
          20倍濃縮洗滌液    (Rinsing Buffer x 20)    1瓶 60.0毫升    2~8℃冷藏保存
          5倍濃縮樣品稀釋液    (Diluent x 5)    1瓶 15.0ml    2~8℃冷藏保存
          英文說明書,中文說明書        各一份    室溫保存

          二、注意事項
          1.  此試劑為體外檢測試劑,效期內(nèi)使用,試劑應視為傳染物,不同總批號的試劑不能混用。
          2.使用前應將盒內(nèi)各試劑取出。室溫放置至少30分鐘,
          3.濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后,請于37℃孵育15分鐘。
          4.濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后,請于37℃孵育15分鐘
          5.若24小時內(nèi)進行實驗,標本可存放于2~8℃。不需及時實驗,標本-20℃保存,避免反復凍融。
          6.在反復清洗微孔板,并扣干微孔中的殘余液體,否則將降低度,造成吸光度偏離的假像。
          7.加樣完畢后,應注意輕微搖動微孔反應條,以便使孔中的液體充分混勻。
          8.試劑盒保存于2~8℃,請勿冷凍,有效期請見盒內(nèi)標示。

          三、人(human)高遷移率族蛋白B1(HMG-B1)實驗前準備
          1.使用前應將盒內(nèi)各試劑取出,室溫放置至少30分鐘。
          2.準備各種實驗儀器及材料,如微量移液器,吸頭,醫(yī)用蒸餾水等
          3.濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1︰19倍稀釋后成為應用洗滌液
          4.濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1︰4倍稀釋成應用樣品稀釋液
          5.用應用樣品稀釋液來稀釋樣品,按照1:100的體積比來稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應用樣品稀釋液中,充分混勻待用。)

          四、人(human)高遷移率族蛋白B1(HMG-B1)操作步驟
          1.取出酶標板,設(shè)空白孔,依照次序?qū)謩e加入100μl的標準品于空白微孔中(空白孔視為0號標準品,用醫(yī)用蒸餾水替代)
          2、分別標記樣品編號,加入100μl的稀釋樣品于空白微孔中(不同的樣本采用不同的吸頭)。
          3、將酶標板置于37℃溫育30分鐘;
          4、將酶標板板取出,將其中的液體甩去,每個孔中全部加滿應用洗滌液后,立即甩去液體;
          5、每個孔中加滿應用洗滌液后,輕微振搖酶標板30秒后將孔中的應用洗滌液甩去,在吸水紙上將酶標板拍干。
          6、重復第5個步驟5次,在吸水紙上將酶標板拍干。
          7、在標準品孔和樣品孔中加入100μl的酶標偶合溶液。
          8、將96孔板置于37℃溫育30分鐘。
          9、將酶標板取出,將其中的液體甩去,每個孔中全部加滿應用洗滌液后,立即甩去液體。
          10、每個孔中再次加滿洗滌應用液后,室溫輕微振搖酶標板30秒后將孔中的應用洗滌液甩去,在吸水紙上將酶標板拍干。
          11、重復第5個步驟5次,在吸水紙上將酶標板拍干。
          12、在每個孔中加入底物A 50μl后立即加入底物B 50μl。輕輕振蕩混勻。(A液、B液采用不同的吸頭加樣)
          13、將酶標板置于37℃避光溫育反應15分鐘。
          14、每個微孔中加入50μl的終止液,輕輕振蕩混勻。
          15、在酶標儀上,450nm處測定OD; 顯色后,15分鐘內(nèi)進行測定。
          16、根據(jù)制備的標準曲線,計算樣本含量

          五、人(human)高遷移率族蛋白B1(HMG-B1)結(jié)果判斷
          1. 儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值;
          2、檢測值范圍:0-24ng/ml
          3、敏感度:0. 1 ng/ml

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