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          ELISA試劑盒的操作程序

          發(fā)布時間: 2017-09-18  點擊次數(shù): 1268次

          ELISA試劑盒操作程序
          1. 分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其他各步操作相同)、規(guī)范品孔、待測樣品孔。在酶標包被板上規(guī)范品孔中參加規(guī)范品50μl;在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。每孔參加酶標試劑50μl,空白孔除外。悄悄晃動混勻,37℃溫育60分鐘。
          2. 測定:以空白孔調(diào)零,在450nm波長下丈量各孔的吸光度值(OD值)。測定應在加停止液后15分鐘以內(nèi)進行。
          3. 依據(jù)elisa試劑盒免費代測規(guī)范品的濃度及對應的OD值核算出規(guī)范曲線的直線回歸方程,再依據(jù)樣品的OD值在回歸方程上核算出對應的樣品濃度。也能夠運用各種應用軟件來核算。應記住因為樣品稀釋了的,其實踐濃度應該乘以總稀釋倍數(shù)。
          4. 棄去液體,甩干,每孔加滿稀釋后洗滌液,振動30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。如此重復5次,拍干。
          5. 每孔先參加顯色劑A50μl,再參加顯色劑B50μl,悄悄震動混勻,37℃避光顯色15分鐘.
          6. elisa試劑盒取出酶標板,每孔加停止液50μl,停止反響(此時藍色立轉(zhuǎn))。

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